光度計可滿足各種應用的要求,可用在生物研究、生物工業(yè)、藥物分析、制藥、教學研究、 環(huán)保、食品衛(wèi)生、臨床檢驗、衛(wèi)生防疫等領域。
光度計的光源燈采用6V/10W插入式鎢鹵素燈,更換時應先切斷電源,取出損壞的鎢鹵素燈,換上新燈,將儀器的波長置于500nm處,開啟儀器電源,移動燈上、下、左、右位置,直到成象在進狹縫上。在T狀態(tài),不調節(jié)100%鍵,(蓋上樣品室蓋)觀察顯示讀數,調整燈使顯示讀數為高即可。
光度計的測定條件的選擇:
一、入射光波長的選擇:
在大吸收波長處測定吸光度不僅能獲得高的靈敏度,而且還能減少由非單色光引起的對朗伯-比爾定律的偏離。因此在光度計的分光光度法測定中一般選擇大吸收波長為入射波長。
二、參比溶液的選擇:
在實驗中,要選擇合適的空白溶液作為參比溶液來調節(jié)光度計的零點,以便消除顯色溶液中其他有色物質的干擾,抵消吸收池和試劑對入射光的影響。根據試樣溶液的性質,選擇合適組分的參比溶液很重要。
三、吸光度范圍選擇與控制:
任何光度計都有一定的測量誤差,測量誤差的來源主要是光源的發(fā)光強度不穩(wěn)定法,光電效應的非線性,電位計的非線性,雜散光的影響,單色器的光不純等因素,對于一臺固定的光度計來說,以上因素都是固定的,也就是說它的誤差具有一定穩(wěn)定性。
四、比色皿的使用:
選擇適宜規(guī)格的比色皿,盡量把吸光度值調整在0.2~0.8之間。同一實驗使用同一規(guī)格的同一套比色皿,以減少測量誤差,所以用普通分光光度法不適用于高含量或較低含量物質的測定。